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怎么调整人ELISA試劑盒试验的对策

發布時間:2020-03-02浏覽次數:2605返回列表

ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的使用,但操作中的各个环节对试验的检测作用影响较大,人ELISA試劑盒如不留意,有或许导致显色不全、花板等结果。


一.下面將操作中各個環節常出現問題解決辦法總結于下:

1.挑选试剂: 挑选质量优良的检测试剂,严厉按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。

2.标本收集与保存: 防止使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;2-8℃下,标本可放置24-48小时,长时间保存需放置-20℃下。请防止重复冻融。

二.人ELISA試劑盒具体请参照:

1.試劑使用中的預備工作及留意事項

2.试剂盒中会有提示,一般需要预备的有: 洗涤液;用前制造;有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月;假如没有标明,尽量用新鲜的,不要多制造。显色液(有A液和B液的),用前15分钟制造

3.規範品:有的試劑盒中規範品是現已制造好的,4度保存;有的是要現制造的;按照說明書操作,濃縮生物素結合的二抗和HRP:假如需要制造,試劑盒沒注明配好可以保存多久的話,盡量現配現用(用前15分鍾制造)

4.原則是:試劑盒上沒有指出制造物的貯藏方法的話,應該現配現用;不要怕麻煩;還有小瓶的管子開蓋前要離心,以免蓋子上粘連今後總量不行

5.加 样:室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的试验操作的试剂,加样对数据的影响比较大,特别要留意加样问题

三.欠好的操作原因:

1.不會正確使用加樣器

2.血清或血漿標本分離欠好即進行加樣

3.人ELISA試劑盒手工操作中,加样板过多形成加样後放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)

4.加完標本再加酶試劑時酶濺起孔外